Key learning objectives

• Review the principles of panel design and how they can be applied to developing high parameter panels for spectral flow cytometry
• Understand how spectral flow cytometry panels can be developed to avoid cross-excitation and data spread
• Understand how key features in the ID7000 Spectral Cell Analyzer such as the reference library, autofluorescence management and instrument standardization can be used to optimize the setup of a high parameter panel to get the highest quality data.

High parameter spectral flow cytometry: Guiding principles for successful panel design and experiment setup on the ID7000™ Spectral Cell Analyzer

With technology advances in high parameter flow cytometry, researchers are learning how to develop large (20+ parameters) flow cytometry panels for deep immune-profiling studies. The introduction of spectral cytometry analyzers has further accelerated scientists' ability to use complex overlapping fluorochromes, giving them greater flexibility in panel design, and allowing them to consider combinations that were previously challenging to resolve with conventional cytometers.

A good panel design is key to the success of a multicolor flow cytometry experiment, especially as the number of fluorochromes in a high parameter panel increases. Users must take into consideration the spectral properties and brightness of the fluorochromes, the relative expression levels of the antigens, marker co-expression, and commercially available fluorescent antibodies. The attributes of the instrument used for acquiring a high parameter panel also play a key role in the sensitivity and resolution of data.

Join us in this webinar to learn about the key principles of flow cytometry panel design as well as the advantages of utilizing them on the ID7000™ Spectral Cell Analyzer. We will discuss how to apply these principles when developing panels with highly overlapping fluorochromes for spectral flow cytometry. Also, we will review how a high parameter experiment can be optimized for the ID7000 Spectral Cell Analyzer. We will discuss how reference controls can be created, updated, and reused across different experiments, and how the superior optics on the system can be optimized to achieve both high resolution and sensitivity without increasing data spread, to obtain the best quality data.

ITALIANO

Obiettivi chiave di apprendimento

Esaminare i principi della progettazione dei pannelli e come possono essere applicati allo sviluppo di pannelli con parametri elevati per la citometria a flusso spettrale

Comprendere come possono essere sviluppati i pannelli di citometria a flusso spettrale per evitare l'eccitazione incrociata e la diffusione dei dati.

Scopri come le funzionalità chiave dell'analizzatore di cellule spettrali ID7000, come la libreria di riferimento, la gestione dell'autofluorescenza e la standardizzazione dello strumento, possono essere utilizzate per ottimizzare la configurazione di un pannello con parametri elevati per ottenere dati della massima qualità.

Informazione

Citometria a flusso spettrale ad alti parametri: principi guida per una progettazione efficace del pannello e una configurazione dell'esperimento sull'analizzatore di cellule spettrali ID7000™

Con i progressi tecnologici nella citometria a flusso ad alti parametri, i ricercatori stanno imparando come sviluppare pannelli di citometria a flusso di grandi dimensioni (oltre 20 parametri) per studi approfonditi di profilazione immunitaria. L'introduzione degli analizzatori di citometria spettrale ha ulteriormente accelerato la capacità degli scienziati di utilizzare complessi fluorocromi sovrapposti, offrendo loro una maggiore flessibilità nella progettazione dei pannelli e consentendo loro di prendere in considerazione combinazioni che in precedenza erano difficili da risolvere con i citometri convenzionali.

Un buon progetto del pannello è la chiave per il successo di un esperimento di citometria a flusso multicolore, soprattutto quando aumenta il numero di fluorocromi in un pannello con parametri elevati. Gli utenti devono prendere in considerazione le proprietà spettrali e la luminosità dei fluorocromi, i livelli di espressione relativi degli antigeni, la coespressione dei marcatori e gli anticorpi fluorescenti disponibili in commercio. Anche le caratteristiche dello strumento utilizzato per l'acquisizione di un pannello con parametri elevati svolgono un ruolo chiave nella sensibilità e nella risoluzione dei dati.

Unisciti a noi in questo webinar per conoscere i principi chiave della progettazione del pannello di citometria a flusso ed i vantaggi del loro utilizzo sull'analizzatore di cellule spettrali ID7000™. Discuteremo come applicare questi principi durante lo sviluppo di pannelli con fluorocromi altamente sovrapposti per la citometria a flusso spettrale. Inoltre, esamineremo come ottimizzare un esperimento con parametri elevati per l'analizzatore di cellule spettrali ID7000. Discuteremo come i controlli di riferimento possono essere creati, aggiornati e riutilizzati in diversi esperimenti e come l'ottica superiore del sistema può essere ottimizzata per ottenere sia alta risoluzione che sensibilità senza aumentare la diffusione dei dati, per ottenere dati della migliore qualità.