Architecture and Stoichiometry of Human Shelterin Using Single-Particle EM and Mass Analysis

Human shelterin is a six-subunit complex that binds telomeres, protects them from the DNA-damage response, and regulates the maintenance of telomeric DNA.

Although high-resolution structures have been generated for individual structured domains of shelterin subunits, the structure and stoichiometry of the full complex is unknown.

In this webinar, Dr. John Zinder, a Senior Scientist in the Structural Biology group at Odyssey Therapeutics, will discuss the purification of shelterin subcomplexes and reconstitution of the entire complex using full-length, recombinant subunits. By combining mass photometry, negative-stain electron microscopy (EM), crosslinking mass spectrometry (XLMS), AlphaFold modelling, and native mass spectrometry (MS), stoichiometries were obtained, as well as domain-scale architectures of shelterin subcomplexes.

In addition, Dr. Zinder will present data on shelterin complexes which feature extensive conformational heterogeneity, regardless of the presence of DNA substrates. He will also explain how shelterin adopts a multitude of conformations and its unusually high structural variability can be beneficial for its many functions at telomeres.

ITALIANO

Principali obiettivi di apprendimento

Scopri come studiare l'eterogeneità conformazionale utilizzando l'analisi di massa di una singola particella, inclusa la fotometria di massa

Comprendere come la modellazione può aiutare nella caratterizzazione di assiemi altamente flessibili, come shelterin

Scopri come la fotometria di massa, specialmente se combinata con tecniche complementari, può essere un potente strumento per determinare la stechiometria di un complesso e la sua eterogeneità compositiva a basse concentrazioni

Informazione

Architettura e stechiometria della Shelterin umana mediante EM a particella singola ed analisi di massa

La shelterina umana è un complesso di sei subunità che lega i telomeri, li protegge dalla risposta al danno del DNA e regola il mantenimento del DNA telomerico.

Sebbene siano state generate strutture ad alta risoluzione per singoli domini strutturati di subunità shelterin, la struttura e la stechiometria dell'intero complesso sono sconosciute.

In questo webinar, il Dr. John Zinder, scienziato senior nel gruppo di Biologia strutturale presso Odyssey Therapeutics, discuterà la purificazione dei sottocomplessi di shelterin e la ricostituzione dell'intero complesso utilizzando subunità ricombinanti a lunghezza intera. Combinando fotometria di massa, microscopia elettronica a colorazione negativa (EM), spettrometria di massa di reticolazione (XLMS), modellazione AlphaFold e spettrometria di massa nativa (MS), sono state ottenute stechiometrie, nonché architetture su scala di dominio di sottocomplessi shelterin.

Inoltre, il Dr. Zinder presenterà dati sui complessi shelterin che presentano un'ampia eterogeneità conformazionale, indipendentemente dalla presenza di substrati del DNA. Spiegherà anche come shelterin adotta una moltitudine di conformazioni e la sua variabilità strutturale insolitamente elevata può essere vantaggiosa per le sue numerose funzioni ai telomeri.