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Giuseppe CotellessaAttended a one-hour webinar and Q&A session entitled"Adopting technologies to streamline biotherapeutics characterization" /
Questo per riconoscimento
Giuseppe Cotellessa
Ha partecipato ad un webinar di un'ora ed ad una sessione di domande e risposte intitolata
"Adozione di tecnologie per semplificare la caratterizzazione bioterapeutica" / #23/8/2022
Dott. Giuseppe CotellessaKey learning objectives
- Significant acceleration is possible in the characterization time for proteins and antibodies.
- Accelerated microdroplet reactions for molecule characterization are possible on the Agilent mass spectrometers with the Jetstream source.
- More accurate size based analysis calibrations are possible with calibration corrections based on CE/MS determined masses.
InformationAdopting technologies to streamline biotherapeutics characterization
The characterization of biotherapeutics is essential to assess their safety, quality, and efficacy. New and improved methods are needed to meet the growing analytical challenges of a new wave of cancer biotherapeutics that have complex structures and impurity profiles. In this presentation, demonstrated, are two technological improvements that will enable both speed and comprehensive characterization of biologics. In the first example, a demonstration on how a time-consuming mAb digestion process (> 30 min) can be benefit from ultrafast enzymatic digestion (< 1 ms) of an intact antibody using microdroplet reactions. (Anal. Chem., 2021, 93, 3997-4005) This capability become powerful for real-time analysis of antibody subunits coupling flow-injection analysis (FIA)-MS with microdroplet reactions. Rapid generation of subunits using microdroplet digestion presents an opportunity for mobility resolved structural characterization of subunits. In addition, these subunits can be further characterized with both collision-induced dissociation (CID) and electron capture dissociation (ECD). In the second example, a workflow for profiling impurities using capillary electrophoresis (CE) techniques is demonstrated. Size-based capillary electrophoresis (i.e., cSDS, GXII) is commonly used to profile and quantify impurities. However, the identification of these impurities is often ambiguous. To overcome these challenges,high-resolution CZE-MS to improve the mapping of impurities detected by routine sized-based electrophoretic methods in a single workstream are coupled. the adoption of these techniques by the biopharma community for rapid and comprehensive analysis of biotherapeutics is envisioned.
ITALIANO
Obiettivi chiave di apprendimento
È possibile un'accelerazione significativa nel tempo di caratterizzazione per proteine e anticorpi.
Reazioni accelerate di microgoccioline per la caratterizzazione delle molecole sono possibili sugli spettrometri di massa Agilent con la sorgente Jetstream.
Sono possibili calibrazioni di analisi basate sulle dimensioni più accurate con correzioni di calibrazione basate su masse determinate CE/MS.
Informazione
Adozione di tecnologie per semplificare la caratterizzazione delle bioterapie
La caratterizzazione delle bioterapie è essenziale per valutarne la sicurezza, la qualità e l'efficacia. Sono necessari metodi nuovi e migliorati per affrontare le crescenti sfide analitiche di una nuova ondata di bioterapie contro il cancro che hanno strutture complesse e profili di impurità. In questa presentazione, sono stati dimostrati due miglioramenti tecnologici che consentiranno sia la velocità che la caratterizzazione completa dei prodotti biologici. Nel primo esempio, una dimostrazione su come un processo di digestione mAb che richiede tempo (> 30 min) può trarre vantaggio dalla digestione enzimatica ultraveloce (< 1 ms) di un anticorpo intatto utilizzando reazioni di microgoccioline. (Anal. Chem., 2021, 93, 3997-4005) Questa capacità diventa potente per l'analisi in tempo reale di subunità anticorpali che accoppiano analisi di iniezione di flusso (FIA)-MS con reazioni di microgoccioline. La rapida generazione di subunità utilizzando la digestione di microgocce offre un'opportunità per la caratterizzazione strutturale delle subunità risolta dalla mobilità. Inoltre, queste subunità possono essere ulteriormente caratterizzate sia con la dissociazione indotta da collisione (CID) che con la dissociazione per cattura di elettroni (ECD). Nel secondo esempio, viene dimostrato un flusso di lavoro per la profilazione delle impurità utilizzando tecniche di elettroforesi capillare (CE). L'elettroforesi capillare basata sulle dimensioni (cioè, cSDS, GXII) è comunemente usata per profilare e quantificare le impurità. Tuttavia, l'identificazione di queste impurità è spesso ambigua. Per superare queste sfide, sono accoppiati CZE-MS ad alta risoluzione per migliorare la mappatura delle impurità rilevate da metodi elettroforetici di routine basati su dimensioni in un unico flusso di lavoro. E' prevista l'adozione di queste tecniche da parte della comunità biofarmaceutica per un'analisi rapida e completa delle bioterapie.