This is to acknowledge that

Attended a one-hour webinar and Q&A session entitled

Overcome Oligonucleotide Analysis Challenges with 2D-LC/MS /  Questo per riconoscimento

Giuseppe Cotellessa

Ha partecipato ad un webinar di un'ora ed ad una sessione di domande e risposte intitolata

"Supera le sfide dell'analisi degli oligonucleotidi con 2D-LC/MS"   / #7-4-2022

Dott. Giuseppe Cotellessa

 

 

 

Overcome Oligonucleotide Analysis Challenges with 2D-LC/MS

With the enormous potential of oligonucleotide therapeutics, there is more interest than ever in choosing the best tools for oligonucleotide synthesis, analysis, and purification. Oligonucleotides synthesized using phosphoramidite chemistry are typically analyzed and purified using ion-pair reversed-phase liquid chromatography (IP-RPLC) and anion-exchange chromatography. Since highly salty mobile phases are not compatible with mass spectrometry, and samples need to be desalted to participate in ion-pairing prior to IP-RPLC analysis, investigators can either manually prepare samples or consider using 2D-LC/MS to obtain a mass measurement from salty first dimension separations. 2D-LC increases the workflow speed and avoids manual sample preparation. Given the complex impurity profiles, varying sequence modifications, and lengths, thoughtful optimization of HPLC methodologies for characterization and purification is essential to obtain pure oligonucleotides for research, diagnostics, and therapeutics. This webinar will discuss the common challenges associated with oligonucleotide analysis and purification and how to overcome them through 2D-LC/MS and method optimization.

ITALIANO

Principali risultati di apprendimento

Scopri come accoppiare più metodi LC per il rilevamento degli oligonucleotidi in un'unica applicazione senza interruzioni

Semplifica le transizioni dai tamponi salati 1D ad una separazione LC-MS di 2a dimensione

Sfide tecniche e impurità associate alla sintesi di oligonucleotidi

Analisi degli oligonucleotidi con strutture oligonucleotidiche variabili (dimensioni, modifiche)

Considerazioni sull'ottimizzazione del metodo per la purificazione in fase inversa della coppia ionica e per l'analisi MS

Supera le sfide dell'analisi degli oligonucleotidi con 2D-LC/MS

Con l'enorme potenziale della terapia degli oligonucleotidi, c'è più interesse che mai nella scelta dei migliori strumenti per la sintesi, l'analisi e la purificazione degli oligonucleotidi. Gli oligonucleotidi sintetizzati utilizzando la chimica della fosforamidite vengono tipicamente analizzati e purificati mediante cromatografia liquida a coppia ionica a fase inversa (IP-RPLC) e cromatografia a scambio anionico. Poiché le fasi mobili altamente salate non sono compatibili con la spettrometria di massa ed i campioni devono essere dissalati per partecipare all'accoppiamento ionico prima dell'analisi IP-RPLC, i ricercatori possono preparare manualmente i campioni o considerare l'utilizzo di 2D-LC/MS per ottenere una misurazione della massa da separazioni salate di prima dimensione. 2D-LC aumenta la velocità del flusso di lavoro ed evita la preparazione manuale del campione. Dati i complessi profili di impurità, le variazioni di sequenza modificate e le lunghezze, l'ottimizzazione ponderata delle metodologie HPLC per la caratterizzazione e la purificazione è essenziale per ottenere oligonucleotidi puri per la ricerca, la diagnostica e la terapia. Questo webinar discuterà le sfide comuni associate all'analisi ed alla purificazione degli oligonucleotidi e come superarle attraverso 2D-LC/MS e l'ottimizzazione del metodo.